關(guān)于支原體培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)

支原體定義：

  支原體（mycoplasma）是一類沒(méi)有細(xì)胞壁、高度多形性、能通過(guò)濾菌器、可用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)增殖的最小原核細(xì)胞型微生物。由于能形成絲狀與分枝形狀，故稱為支原體。支原體廣泛存在于人和動(dòng)物體內(nèi)，大多不致病，對(duì)人致病的支原體主要有肺炎支原體、溶脲脲原體、人型支原體、生殖器支原體等。

支原體結(jié)構(gòu)：

  支原體的大小為0.1～0.3um，可通過(guò)濾菌器，常給細(xì)胞培養(yǎng)工作帶來(lái)污染的麻煩。菌落小（直徑0.1-1.0mm），在固體培養(yǎng)基表面呈*的"油煎蛋"狀。無(wú)細(xì)胞壁，不能維持固定的形態(tài)而呈現(xiàn)多形性，對(duì)滲透壓敏感，對(duì)抑制細(xì)胞壁合成的抗生素不敏感。革蘭氏染色不易著色，故常用Giemsa染色法將其染成淡紫色。細(xì)胞膜中膽固醇含量較多，約占36%，對(duì)保持細(xì)胞膜的完整性具有一定作用。細(xì)胞膜含甾醇，比其他原核生物的膜更堅(jiān)韌。凡能作用于膽固醇的物質(zhì)均可引起支原體膜的破壞而使支原體死亡。

   支原體基因組為一環(huán)狀以雙鏈DNA，分子量小（僅有大腸桿菌的五分之一），合成與代謝很有限。

   肺炎支原體的一端有一種特殊的末端結(jié)構(gòu)（terminal structure），能使支原體粘附于呼吸道粘膜上皮細(xì)胞表面，與致病性有關(guān)。

支原體分類：

  一般能分解葡萄糖的支原體則不能利用精氨酸，能利用精氨酸的則不能分解葡萄糖，據(jù)此可將支原體分為兩類。解脲支原體不能利用葡萄糖或精氨酸，但可利用尿素作能源。

   各種支原體都有特異的表面抗原結(jié)構(gòu)，很少有交叉反應(yīng)，具有型特異性。應(yīng)用生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)（Growth inhibition test,GIT）、代謝抑制試驗(yàn)（Metabolic inhibition test,MIT）等可鑒定支原抗原，進(jìn)行分型。

   它廣泛分布于自然界，有80余種。與人類有關(guān)的支原體有肺炎支原體（M-pneumonie，Mp）、人型支原體（UU 分解尿素支原體）和生殖器支原體（M.genitalium，MG）等。

   肺炎支原體引起肺炎。現(xiàn)已從人類泌尿生殖道分離出來(lái)7種支原體，其中分離率較高而與泌尿生殖道疾病有關(guān)，是解脲支原體，其次是人型支原體。人型支原體（M.humenis，MH）、解脲支原體（Ureaplasma urealyticum，UU）和生殖器支原體（M.genitalium，MG）都會(huì)引起泌尿生殖道感染。

    自然界中廣泛存在絕大多數(shù)生長(zhǎng)需膽固醇，在遺傳上與細(xì)菌無(wú)關(guān)，且無(wú)論在什么條件下也不能變成細(xì)菌菌落較小，0.1～0.3mm。

培養(yǎng)條件：

  營(yíng)養(yǎng)要求比一般細(xì)菌高，除基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還需加入10～20%人或動(dòng)物血清以提供支原體所需的膽固醇。最適pH7.8～8.0之間，低于7.0則死亡，但解脲支原體最適pH6.0～6.5。

   大多數(shù)兼性厭氧，有些菌株在初分離時(shí)加入5%CO2生長(zhǎng)更好。生長(zhǎng)緩慢，在瓊脂含量較少的固體培養(yǎng)基上孵育2～3天出現(xiàn)典型的“荷包蛋樣"菌落：圓形（直徑10～16um），核心部分較厚，向下長(zhǎng)入培養(yǎng)基，周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。此外，支原體還能在雞胚絨毛尿囊膜或培養(yǎng)細(xì)胞中生長(zhǎng)。